核酸提取儀工作原理及分類(lèi)介紹
核酸提取儀核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來(lái)自動(dòng)完成樣本核酸提取工作的儀器。由于提取原理不同可將核酸提取儀分為兩類(lèi)。分別是采用離心柱法的儀器和采用磁珠法的儀器。
采用離心柱法的儀器
離心柱法核酸提取儀主要采用離心機(jī)和自動(dòng)移液裝置相結(jié)合的方法,通量***般在1-12個(gè)樣本,操作時(shí)間和手工提取差不多,并不能提高實(shí)際工作效率,且價(jià)格昂貴,不同型號(hào)儀器的耗材也不能通用,僅適合經(jīng)費(fèi)充足的大型實(shí)驗(yàn)室使用。
采用磁珠法的儀器
以磁珠為載體,利用磁珠在高鹽低PH值下吸附核酸,在低鹽高PH值下與核酸分離的原理,再通過(guò)移動(dòng)磁珠或轉(zhuǎn)移液體來(lái)實(shí)現(xiàn)核酸的整個(gè)提取純化過(guò)程。由于其原理的獨(dú)特性,所以可設(shè)計(jì)成很多種通量,既可以單管提取,也可以提取8-96個(gè)樣本,且其操作簡(jiǎn)單快捷,提取96個(gè)樣本僅需30-45min,大大提高了實(shí)驗(yàn)效率,且成本低廉,因而可以在不同實(shí)驗(yàn)室使用,是目前市場(chǎng)上的主流儀器。
磁珠法核酸提取儀的工作原理也分為兩種分別抽吸法和磁棒法
1. 磁棒法
磁棒法是利用磁珠的轉(zhuǎn)移,液體的固定來(lái)使核酸的分離得以實(shí)現(xiàn)。其和抽吸法的原理和過(guò)程相同。磁珠和液體分離的方式有差異。磁棒法是通過(guò)磁棒對(duì)磁珠的吸附從廢液中分離開(kāi)磁珠,在下***步的液體中將其放入,使核酸的提取得以實(shí)現(xiàn)。
2.抽吸法
抽吸法又稱(chēng)為移液法,是利用液體的轉(zhuǎn)移或者磁珠的固定來(lái)使核酸的提取得以實(shí)現(xiàn)的。通常利用對(duì)系統(tǒng)控制機(jī)械臂的操作來(lái)實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)移,有如下提取過(guò)程:
裂解:將裂解液加入到樣品中,利用機(jī)械運(yùn)動(dòng)及加熱來(lái)混勻反應(yīng)液和使反應(yīng)充分。裂解細(xì)胞,使核酸釋放出來(lái)。
吸附:將磁珠加入到樣品裂解液中,充分混勻,通過(guò)磁珠在高鹽低PH值下對(duì)核酸親和力很強(qiáng)的特點(diǎn),對(duì)核酸吸附,在外加磁場(chǎng)作用下,分離磁珠與溶液,通過(guò)吸頭轉(zhuǎn)移到廢液槽中,棄掉吸頭。
洗滌:將外加磁場(chǎng)撤去,使用新吸頭將洗滌緩沖液加入,充分混勻,將雜質(zhì)去除,在外加磁場(chǎng)作用下,移出液體。
洗脫:將外加磁場(chǎng)撤去,使用新吸頭將洗脫緩沖液加入,充分混勻,結(jié)合的核酸就和磁珠分離,從而使純化的核酸獲得。
除了提取原理不同之外不同型號(hào)的核酸提取儀也可分為不同的種類(lèi),分別是自動(dòng)液體工作站和小型自動(dòng)核酸提取儀。
自動(dòng)液體工作站
自動(dòng)液體工作站是功能非常強(qiáng)大的設(shè)備,液體分液、吸液等自動(dòng)完成,甚至能通過(guò)整合擴(kuò)增、檢測(cè)等功能,實(shí)現(xiàn)標(biāo)本提取、擴(kuò)增、檢測(cè)全自動(dòng)化。提取核酸只是其功能的***個(gè)應(yīng)用,不太適合常規(guī)實(shí)驗(yàn)室提取核酸,***般都應(yīng)用在單***類(lèi)標(biāo)本并且***次提取標(biāo)本量非常大(至少96個(gè),***般幾百個(gè))的實(shí)驗(yàn)需求上。自動(dòng)工作站的平臺(tái)建立及平臺(tái)的運(yùn)作,需要比較大的資金。
小型自動(dòng)核酸提取儀
小型的自動(dòng)化儀器是通過(guò)運(yùn)行結(jié)構(gòu)的特殊性來(lái)達(dá)到自動(dòng)提取核酸的目的,可以在任何實(shí)驗(yàn)室得到應(yīng)用。
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