色譜柱使用注意事項(xiàng)
色譜柱是***種內(nèi)有固定相用于分離混合物的柱管,譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及色譜柱的制備和操作條件。在使用時(shí)要格外注意這樣才不會影響柱銷和縮減使用壽命。那么下面就和大***說說色譜柱的使用注意事項(xiàng)。
要避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的驟變或者色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況。
要逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,尤其是反相色譜中。
***般說來色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。
選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。可適當(dāng)?shù)?/span>在進(jìn)樣器前面連接***預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠。
避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接***保護(hù)柱。
注:保護(hù)柱***般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
要經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,清除殘留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。
保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,將柱接頭擰緊,以防溶劑揮發(fā)干燥。不能將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時(shí)間。
色譜柱使用過程中,如果壓力升高,燒結(jié)濾片被堵塞時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗;大分子進(jìn)入柱內(nèi),使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,死體積增大。
在分析柱前裝***根與分析柱相同固定相的短柱(5~30mm),保護(hù)、延長柱壽命。
色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達(dá)2年以上。以硅膠為基質(zhì)的填料,只能在pH2~9范圍內(nèi)使用。
每次工作完后,***好用洗脫能力強(qiáng)的洗脫液沖洗,例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。
采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí),使用完后應(yīng)用無鹽流動(dòng)相沖洗。
含鹵族元素(氟、氯、溴)的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道,不宜長期與之接觸。
裝在HPLC儀上柱子如不經(jīng)常使用,應(yīng)每隔4~5天開機(jī)沖洗15分鐘。
以上內(nèi)容則是色譜柱使用注意事項(xiàng)希望能夠?yàn)榇?**帶來幫助。